真菌活性氧檢測 ROS試劑 綠色熒光
 
  試劑準備:
 
  根據樣本數量,用純水將O08探針10倍稀釋。充分混勻,備用。
 
  樣本處理:
 
  1. 剛取得的新鮮組織樣本用PBS洗凈。
 
  2. 準確稱取50 mg或100 mg組織樣本,加入500 μl-1 ml勻漿緩沖液A,用勻漿機/勻漿器充分勻漿。
 
  3. 在100×g,4℃離心5分鐘,取上清備用。
 
  樣本檢測:
 
  1. 在96孔板中加入190微升勻漿上清液、10微升O08探針,用移液器吹打,使之充分混勻。
 
  2. 在37℃避光孵育20-30分鐘。
 
  3. 置于酶標儀中,激發波長為488-535 nm、發射波長606 nm檢測熒光強度。
 
  蛋白定量:
 
  1. 另取50微升上清勻漿液,用PBS大約稀釋30倍。
 
  2. 取100微升進行蛋白定量。
 
  結果處理:
 
  以熒光強度(RFU)/蛋白濃度(毫克蛋白)表示組織活性氧強度。